No utilice rotenona a concentraciones superiores a mM. Proceder conforme consejos de prudencia apropiados. Evite que el tubo de la luz. Ajustar la incubadora de aire de pez cebra a 28 y ; C.
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Pantalla para el desarrollo de los embriones. Tratamiento de los embriones con el agente oxidante Utilice por lo menos 30 embriones entre las 48 hpf y 72 HPF por diferentes condiciones. Dividir embriones fluorescentes en tres platos. Enjuague con HBSS tanto como sea posible.
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Evite que el tubo de la luz utilizando papel de aluminio. Lavar embriones invirtiendo el tubo varias veces. Embriones Aspirar hasta en una pipeta Pasteur de vidrio. Comparar la fluorescencia del control de los embriones con embriones tratados. Transferencia de embriones en un nuevo plato.
Un ensayo para la línea lateral de regeneración en adultos de pez cebra
Eliminar el agua los peces tanto como sea posible. Dechorionate manualmente embriones con unas pinzas y quite el saco vitelino con una aguja fina. Este paso se puede evitar de acuerdo con instrumento de FACS. Homogeneizar embriones pipeteando suavemente hacia arriba y hacia abajo con una pipeta de punta estrecha 1. Please recommend JoVE to your librarian. A Embriones de pez cebra en 72 HPF fueron sometidosa heridas como se describe anteriormente por Niethammer et al. La barra de escala 20 micras. La barra de escala, m. E00 Voltaje , 2,1 AmpGain , Modo: Una muestra no incubada con la sonda ROS-sensible se ha incluido como control negativo.
FACS acervoajustes ition fueron los siguientes: Las mediciones se relacionan con muestras mostradas en C. Una vez que la sonda fluorescente se oxida por ROS no pueda entrar de nuevo a su no fluorescente estado reducido. Los principales componentes de este grupo son: Really it's interesting paper, But please Can we Know the ROS-sensitive prob that used in this paper in case of generic and mitochondrial oxidative stress?
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Analysis of Oxidative Stress in Zebrafish Embryos | Protocol (Translated to Spanish)
Fill out the form below to receive a free trial or learn more about access: Autoclave listo para el uso del agua de pescado antes de su uso. En todos los casos los peces experimentales, incluyendo controles fueron tratados en paralelo para eliminar la variabilidad experimental.
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Tal enfoque puede ser tomada entre cualquier grupo de control y el experimento cuando sea necesario para extender o confirmar los datos obtenidos a partir de la primera fase de los estudios neuromast. You must be signed in to post a comment. Please sign in or create an account.
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Coloque las placas desde el paso 2. Coloque el pescado en exceso de agua normal de los peces para enjuagar el exceso de colorante vital y vaya al paso 3. Coloque la muestra de la piel en un portaobjetos de vidrio y luego se coloca una hoja de cubierta de vidrio circular sobre la muestra de piel extirpadas para ayudar ancla y aplanar el tejido para la imagen digital posterior.